Belangrijkste verschil - RPMI versus DMEM
De meeste onderzoeken omvatten het kweken van dierlijke cellen en daarom vereisen deze onderzoeken het onderhoud van dierlijke cellijnen onder speciale groeiomstandigheden. Het kweken van dierlijke cellen wordt op grote schaal uitgevoerd in farmacologische studies om het metabolisme van geneesmiddelen te identificeren, bij ziektediagnostiek en bij kankeronderzoek. Het celkweekmedium is een belangrijk aspect van dierlijke celkweek. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) en Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) zijn twee kweekmedia die worden gebruikt bij het kweken van dierlijke cellen. RPMI is een medium dat op grote schaal wordt gebruikt om zoogdiercellen in suspensiekweek te kweken. DMEM is een gemodificeerd type basaal medium, met verhoogde aminozuur- en vitamineconcentraties tot een viervoud. DMEM wordt gebruikt bij het kweken van cellen in aanhangende culturen. Het belangrijkste verschil tussen de twee media is het type cultuur van de media. RPMI wordt gebruikt op suspensiekweken, terwijl DMEM wordt gebruikt om hechtende cellen te kweken.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is RPMI
3. Wat is DMEM
4. Overeenkomsten tussen RPMI en DMEM
5. Vergelijking zij aan zij - RPMI versus DMEM in tabelvorm
6. Samenvatting
Wat is RPMI?
RPMI of Roswell Park Memorial Institute Medium wordt ook wel RPMI 1640 genoemd. De naam van de media is afgeleid van het instituut waarin de media zijn ontdekt. Dit medium wordt veel gebruikt in de celcultuur van dieren, vooral voor de groei van zoogdiercellen. Ze zijn oorspronkelijk ontwikkeld om menselijke lymfocyten te laten groeien.
De volgende ingrediënten zijn opgenomen in de RPMI.
- Glucose
- pH-indicator (fenolrood)
- Zouten (natriumchloride, natriumbicarbonaat, dinatriumfosfaat, kaliumchloride, magnesiumsulfaat en calciumnitraat)
- Aminozuren
- Vitaminen (i-inositol, cholinechloride, para-aminobenzoëzuur, foliumzuur, nicotinamide, pyridoxinehydrochloride, thiaminehydrochloride, calciumpantothenaat, biotine en riboflavine, cyanocobalamine)
Het bijzondere aan RPMI is de verhoogde fosfaatconcentratie in het medium. RPMI wordt gebruikt in een atmosfeer van 5% kooldioxide. Dit zorgt voor de maximale en optimale omstandigheden voor de celgroei. De pH van de media wordt op 8,0 gehouden door het bicarbonaatbuffersysteem.
Figuur 01: celkweek op een petrischaal
Toepassingen van RPMI in celkweek
- Teelt van menselijke T- en B-lymfocyten, beenmergcellen en hybridoma.
- Gebruikt om menselijke neoplastische cellen te bestuderen.
Wat is DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) is een gemodificeerd medium dat commercieel wordt bereid. De oorspronkelijke textuur van het medium poeder is geel. Bij DMEM wordt de vitamineconcentratie verviervoudigd, waardoor het gehalte aan voedingsstoffen in het medium toeneemt.
DMEM wordt ook gemodificeerd door meer zouten toe te voegen, zoals ijzer (III) nitraat, natriumpyruvaat en enkele niet-essentiële aminozuren zoals serine en glycine. De formulering van glucose in de media wordt ook gewijzigd. De oorspronkelijke formulering is samengesteld uit 1000 mg / l glucose, terwijl in DMEM de concentratie wordt verhoogd tot 4500 mg / l. DMEM vereist ook suppletie van een serummedium omdat het geen compleet medium is. Meestal wordt DMEM aangevuld met Fetal Bovine Serum (FBS). FBS levert de benodigde eiwitten en groeifactoren voor het kweekproces.
De pH van het medium varieert na toevoeging van natriumbicarbonaat. De pH van het medium voor het toevoegen van natriumbicarbonaat is ongeveer 6,80 - 7,40, terwijl de pH na het toevoegen van natriumbicarbonaat in het bereik van 7,60 - 8,20 ligt. De opslagtemperatuur van het medium is 2 - 8 0 C.
Figuur 02: DMEM
Toepassingen van DMEM
- Onderzoek naar het plaquevormend vermogen van het polyomavirus in embryonale cellen van muizen.
- In onderzoek naar contactremming.
- In onderzoek en analyse van kippencelculturen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen RPMI en DMEM?
- Zowel RPMI als DMEM worden gebruikt in de celcultuur van dieren.
- Zowel RPMI- als DMEM-media zijn vloeibare formuleringen.
- Zowel RPMI- als DMEM-media bevatten de essentiële aminozuren, vitamines en anorganische zouten die nodig zijn voor groei.
- Zowel RPMI- als DMEM-media zijn onvolledig. Daarom moet serum worden toegevoegd.
- Zowel RPMI- als DMEM-media gebruiken glucose als koolstofbron.
- Zowel RPMI- als DMEM-media hebben een hogere pH.
Wat is het verschil tussen RPMI en DMEM?
Diff Artikel Midden voor Tafel
RPMI versus DMEM |
|
| RPMI is een medium dat op grote schaal wordt gebruikt om zoogdiercellen in een suspensiekweek te kweken. | DMEM is een gemodificeerd basaal medium met verhoogde aminozuur- en vitamineconcentraties. |
| Aanwezigheid van extra fosfaten | |
| Aanwezig in RPMI. | Afwezig in DMEM. |
| Gebruik | |
|
Gebruikt om cellen in aanhangende culturen te kweken. Het is gewend,
|
| Soorten cultuur | |
| RPMI wordt gebruikt voor suspensiekweken. | DMEM wordt gebruikt voor culturen met gehechte cellen. |
Samenvatting - RPMI versus DMEM
Zowel RPMI als DMEM worden veel gebruikt bij het kweken van dierlijke cellen, in het bijzonder voor het in vitro kweken van dierlijke cellijnen, waaronder lymfocyten. DMEM is een gemodificeerd basaal medium met een verhoogde nutriëntenconcentratie. RPMI ontwikkeld door Roswell Park Memorial Institute, en het is ook een medium dat wordt gebruikt bij het kweken van dierlijke cellen, vooral voor zoogdierlymfocyten. Beide media zijn in de handel verkrijgbaar. Dit is het verschil tussen RPMI en DMEM.
