Verschil Tussen HPLC En LCMS

2024 Auteur: Mildred Bawerman | [email protected]. Laatst gewijzigd: 2023-12-16 08:40

Belangrijkste verschil - HPLC versus LCMS

Laten we eerst kijken naar de betekenis van HPLC en LCMS voordat we het verschil tussen HPLC en LCMS analyseren. Chromatografie is een scheidingstechniek bij chemische analyse waarbij monsterbestanddelen worden gescheiden tijdens passage door een chromatografisch medium. Het omvat ook interactie met het monster, de stationaire fase en de mobiele fase. HPLC staat voor High Performance Liquid Chromatography en wordt gebruikt als vloeistofchromatografiemethode in de analytische chemie. De combinatie van vloeistofchromatografie en massaspectroscopie (LCMS) is ontwikkeld voor de kwantitatieve analyse van geselecteerde biomoleculen en het is een zeer gevoelige, nauwkeurige en specifieke testprocedure in vergelijking met HPLC. Dit is het belangrijkste verschil tussen HPLC en LCMC. Dit artikel laat je kennismaken met HPLC en LCMC die te maken hebben met chemische analyse en bespreekt de verschillen tussen HPLC en LCMS.

Wat is HPLC?

Krachtige vloeistofchromatografie (HPLC) is een populaire scheidingstechniek in de analytische chemie. Het wordt voornamelijk gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren. Eerder stond deze methode bekend als hogedrukvloeistofchromatografie omdat het afhankelijk was van pompen om een onder druk staand vloeibaar oplosmiddel dat het monstermengsel omvat, door een kolom te laten stromen die is gepakt met een vast adsorberend materiaal. Elk bestanddeel in het monstermengsel heeft een verschillende wisselwerking met het vaste adsorberende materiaal, wat resulteert in verschillende stroomsnelheden voor verschillende bestanddelen. Dit kan leiden tot scheiding van de bestanddelen terwijl ze uit de HPLC-kolom stromen.

HPLC is gebruikt voor verschillende toepassingen, zoals analyse van vitamine D-spiegels in bloed, illegaal drugsgebruik van atleten door het detecteren van medicijnresten in hun urine, het uitsorteren van de bestanddelen van een complex biologisch monster voor onderzoeksdoeleinden en analyse en productie van geneesmiddelen.

Wat is LCMS?

Vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LCMS) is een analytische techniek die de fysische scheidingsmogelijkheden van vloeistofchromatografie combineert met de massa-analysecapaciteiten van massaspectrometrie (MS). Vloeistofchromatografie is een scheidingstechniek en massaspectrometrie wordt gebruikt om de massa-tot-ladingverhouding van geladen deeltjes te analyseren. De fysieke scheiding wordt meestal bereikt door HPLC en als alternatief LCMS ook bekend als HPLC-MS. LCMS is een dominante analytische techniek met een zeer hoge nauwkeurigheid, gevoeligheid en specificiteit in vergelijking met HPLC. Het is dus nuttig in vele toepassingen zoals onderzoeksdoeleinden, geneesmiddelenanalyse, voedselanalyse, enz. LCMS wordt voornamelijk gebruikt om biochemische eigenschappen van een bepaald monster te scheiden, op te sporen, te identificeren en te kwantificeren in de aanwezigheid van complexe chemische mengsels.

Wat is het verschil tussen HPLC en LCMC?

Acroniem en definitie van HPLC en LCMC

HPLC: HPLC staat voor High-Performance Liquid Chromatography. Het is een scheidingstechniek die voornamelijk wordt gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren.

LCMS: LCMS staat voor Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Het is een analytische techniek die de fysieke scheidingsmogelijkheden van vloeistofchromatografie combineert met de massaanalysecapaciteiten van massaspectrometrie (MS).

Kenmerken van HPLC en LCMC

Classificatie

HPLC: dit is alleen een vloeistofchromatografiemethode.

LCMS: dit is een combinatie van vloeistofchromatografiemethode en massaspectrometriemethode.

Efficiëntie

HPLC: in vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder efficiënt en trager.

LCMS: in vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse efficiënt en sneller.

Gevoeligheid

HPLC: in vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder gevoelig.

LCMS: In vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse gevoeliger.

Specificiteit

HPLC: in vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder specifiek.

LCMS: Vergeleken met HPLC is de LCMS-analyse specifieker.

Nauwkeurigheid

HPLC: HPLC geeft minder nauwkeurige resultaten dan LCMS voor de bepaling van sommige chemicaliën.

LCMS: LCMS geeft nauwkeurigere resultaten dan HPLC voor de bepaling van sommige chemicaliën.

Component

HPLC: HPLC kan worden beschouwd als een onderdeel van LCMS.

LCMS: LCMS kan niet worden beschouwd als een onderdeel van HPLC.

Ionenbron

HPLC: Ionenbron bestaat niet in HPLC-instrument.

LCMS: Ionenbron is aanwezig in LCMS-instrument.

Toepassingen

HPLC: ionen, polymeren, organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd met HPLC.

LCMS: organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd. In tegenstelling tot HPLC kan LCMS worden gebruikt om onvolledig opgeloste mengsels te onderzoeken.

Operatie

HPLC: Het diagram van een HPLC-instrument wordt weergegeven in figuur 1 en bevat meestal een autosampler, pompen en een detector. De monsternemer brengt het monstermengsel in de mobiele fase (onder druk gezet mengsel van oplosmiddelen zoals water, acetonitril en / of methanol) die het overbrengt naar de kolom. De pompen leveren het gewenste debiet en de samenstelling van de mobiele fase door de kolom. De kolom is gevuld met het adsorbens, dat een korrelig vast deeltje is, zoals silica of polymeren. De detector produceert een signaal dat evenredig is aan de hoeveelheid monsterbestanddeel dat in de kolom aanwezig is, waardoor kwantificeerbare analyse van de geselecteerde monsterbestanddelen mogelijk is. Het HPLC-instrument wordt aangestuurd en de gegevensanalyse wordt verzorgd door een digitale microprocessor en gebruikerssoftware.

Figuur 1: diagram van HPLC-instrument

LCMS: Het diagram van het LCMS-instrument wordt weergegeven in figuur 2. Het monsterextract wordt ingebracht in de kolom die bestaat uit HPLC. Deze kolom bevat metabolieten van monsters op basis van fysieke karakters, en verschillende metabolieten stromen met verschillende tijdsintervallen naar de massaspectrometer. Massaspectroscopie wordt gebruikt voor het beoordelen van deeltjesmassa's, voor het bepalen van de elementaire rangschikking van een molecuul en voor het verduidelijken van de molecuulstructuren. Het monster moet echter worden geïoniseerd om geladen moleculen te genereren om hun massa-tot-ladingverhoudingen te bepalen. Daarom bestaan LCMS in plaats van HPLC-instrumenten uit drie extra modules, zoals een ijzerbron, een massa-analysator en een detector. Een ionenbron kan gasfase-monster in ionen omzetten en een massa-analysator die de ionen groepeert op basis van hun massa met behulp van elektromagnetische velden. Tenslotte,een detector kwantificeert de waarden en levert gegevens van elk ion dat in het monster aanwezig is. De LCMS-techniek kan worden gebruikt voor zowel kwalitatieve als kwantitatieve toepassingen.

Figuur 2: diagram van LCMS-instrument

Kortom, HPLC is een vloeistofchromatografiemethode, terwijl LCMS een combinatie is van vloeistofchromatografie en massaspectrometrie. Beide analysetechnieken hebben verschillende kenmerken, maar ze kunnen worden gebruikt om voedselsamenstellingen, farmaceutische producten en andere bioactieve moleculen te identificeren en te kwantificeren.