Belangrijkste verschil - Gramkleuring versus zuur snel
Bacteriën zijn zeer kleine micro-organismen. Ze zijn transparant en hun detectie is moeilijk onder levende en onbevlekte omstandigheden. Zo zijn er verschillende kleuringsmethoden ontwikkeld om bacteriële detectie te vergemakkelijken. Er zijn drie belangrijke soorten kleuringstechnieken: eenvoudige kleuring, differentiële kleuring en structurele kleuring. Differentiële kleuring is een techniek waarbij meer dan één kleurstof wordt gebruikt om bacteriën te onderscheiden. Gramkleuring en zuurvaste kleuring zijn in de volksmond bekend als differentiële kleuringen. Gramkleuring is een differentiële kleuringstechniek, die bacteriën in twee groepen verdeelt die bekend staan als Gram-positieve bacteriën en Gram-negatieve bacteriën. De zuurvaste vlek is een differentiële vlek die wordt gebruikt om zuurvaste organismen zoals Mycobacterium te identificeren van niet-zuurvaste organismen. Dit is het belangrijkste verschil tussen gramkleuring en zuurvaste kleuring.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is gramkleuring
3. Wat is zuurvast
4. Overeenkomsten tussen gramkleuring en zuurvast
5. Vergelijking zij aan zij - Gramkleuring versus zuurvast in tabelvorm
6. Samenvatting
Wat is gramkleuring?
Gramkleuring is een belangrijke differentiële kleuringstechniek die wordt gebruikt voor bacteriële identificatie in de microbiologie. Deze techniek werd in 1884 geïntroduceerd door de Deense bacterioloog Hans Christian Gram. Gramkleuring categoriseert bacteriën in twee hoofdgroepen, grampositief en gramnegatief genaamd, die erg belangrijk zijn bij de classificatie en identificatie van bacteriën. Microbiologen voeren gramkleuring uit als een eerste stap in de karakterisering van bacteriën tijdens hun studies.
Bacteriën worden gegroepeerd op basis van de verschillen in hun celwand. Grampositieve bacteriën zijn samengesteld uit een dikke peptidoglycaanlaag in hun celwand, terwijl gramnegatieve bacteriën zijn samengesteld uit een dunne peptidoglycaanlaag in hun celwand. Het resultaat van de gramkleuring zal worden gebaseerd op het verschil in dikte van de peptidoglycaanlaag van de celwand.
Gramkleuring wordt uitgevoerd met behulp van vier verschillende reagentia, namelijk; primaire beits, bijtende, ontkleurende agent en tegenbeits. Kristalviolet en safranine worden gebruikt als de primaire en tegenkleuring, terwijl gram jodium en 95% alcohol worden gebruikt als respectievelijk het bijtmiddel en de ontkleuring. De basisstappen van gramkleuring zijn als volgt;
- Een bacterieel uitstrijkje wordt gemaakt op een schoon glasplaatje, met warmte gefixeerd en gekoeld.
- Het uitstrijkje wordt 1 - 2 minuten overspoeld met kristalviolet.
- Smeer wordt gespoeld met langzaam stromend kraanwater om overtollige vlekken te verwijderen.
- Gram jodium wordt gedurende 1 minuut op het uitstrijkje aangebracht.
- Uitstrijkje wordt gespoeld met langzaam stromend leidingwater
- Het uitstrijkje wordt 2 - 5 seconden gewassen met 95% alcohol en gespoeld met langzaam stromend kraanwater.
- Het uitstrijkje wordt gedurende 1 minuut tegengekleurd met safranine
- Het uitstrijkje wordt met langzaam stromend kraanwater gespoeld, gedroogd en onder de microscoop bekeken.
Aan het einde van de gramkleuring zullen gramnegatieve bacteriën in roze kleur worden waargenomen, terwijl grampositieve bacteriën in paarse kleur worden waargenomen.
Figuur 01: Gram-negatieve en gram-positieve bacteriën
Het resultaat van de gramkleuring wordt bepaald door de dikte van de peptidoglycaanlaag in hun celwand. Tijdens de ontkleuringstap worden de primaire vlek en het bijtmiddel gemakkelijk verwijderd uit de gramnegatieve bacteriën en worden ze kleurloos omdat ze een dunne peptidoglycaanlaag hebben. De primaire vlek blijft behouden in de gram-positieve bacteriën omdat ze een dikke peptidoglycaanlaag hebben. De tegenkleuring zal niet effectief zijn voor gram-positieve bacteriën vanwege het behoud van de primaire kleuring. Gram-positieve bacteriën zullen dus zichtbaar zijn in de primaire kleur van de vlek, dat wil zeggen paarse kleur. De tegenkleuring zal de gramnegatieve bacteriën kleuren en ze zullen zichtbaar zijn in de kleur van de pick, de safraninekleur. Daarom is het gemakkelijk om bacteriën in twee groepen in te delen op gramkleuring en het is waardevol bij bacteriële differentiatie en identificatie.
Wat is zuurvast?
Zuurvastheid is een fysische eigenschap van bepaalde bacteriën, met name hun weerstand tegen verkleuring door zuren tijdens kleuringsprocedures. Eenmaal gekleurd, zijn deze organismen bestand tegen ontkleuring op basis van verdund zuur en / of ethanol, die gebruikelijk zijn in veel kleuringsprotocollen. Dus de naam 'zuurvast' wordt aan die organismen gegeven. Deze eigenschap wordt getoond door een hoog gehalte aan wasachtig materiaal (mycolzuren) in hun celwanden. Deze test is cruciaal voor de identificatie van Mycobacterium tuberculosis.
Figuur 2: Acid Fast Mycobacteria
Deze zuurvaste beits werd in 1882 ontwikkeld door Paul Ehrlich. De zuurvaste techniek van Ehrlich werd aangepast door Ziehl-Neelsen en wordt nu vaker gebruikt. Bij de zuurvaste kleuringsprocedure zijn drie verschillende reagentia betrokken. Carbol fuschin wordt gebruikt als primaire beits. Zure alcohol wordt gebruikt als ontkleuringsmiddel. Methyleenblauw wordt gebruikt als tegenkleuring. De kleuringsprocedure wordt als volgt uitgevoerd.
- De primaire kleurstof (carbol fuchsin) wordt aangebracht op het gefixeerde preparaat op het objectglaasje (alle cellen worden rood gekleurd).
- Het glaasje wordt verwarmd door gedurende 5 minuten te stomen, waardoor de vlekken goed in de cellen komen.
- Vervolgens wordt de ontkleurende oplossing toegevoegd (dit verwijdert de rode kleurstof uit alle cellen behalve de zuurvaste bacteriën).
- Methyleenblauw wordt toegevoegd als tegenkleuring (het kleurt alle ontkleurde bacteriecellen).
- Zuurvaste bacteriën blijven rood, terwijl zuurvaste bacteriën blauw kleuren.
Wat zijn de overeenkomsten tussen gramkleuring en zuurvast?
- Gramkleuring en zuurvast zijn twee differentiële kleuringstechnieken.
- Beide technieken categoriseren bacteriën in twee groepen.
- Beide technieken gebruiken twee vlekken en één ontkleuring.
Wat is het verschil tussen gramkleuring en zuurvast?
Diff Artikel Midden voor Tafel
Gramkleuring versus zuur snel |
|
| Gramkleuring is een differentiële kleuringstechniek, die bacteriën in twee groepen Gram-positieve bacteriën en Gram-negatieve bacteriën scheidt. | Zuurvaste kleuring is een differentiële kleuring die wordt gebruikt om zuurvaste organismen te identificeren van niet-zuurvaste organismen. |
| Primaire vlek | |
| Kristalviolet is de meest gebruikte primaire kleurstof bij gramkleuring. | Carbol-fuchsine is de primaire kleurstof die wordt gebruikt bij zuurvast. |
| Ontkleurende agent | |
| 95% alcohol wordt gebruikt als ontkleuringsmiddel in gramkleuring. | Zure alcohol wordt gebruikt als ontkleuringsmiddel in zuurvast. |
| Tegenvlek | |
| Gramkleuring gebruikt safranine als tegenkleuring. | Zure snelle kleuring gebruikt methyleenblauw als tegenkleuring. |
| Observatie | |
| Gram-negatieve bacteriën worden waargenomen in de kleur van de pick en gram-positieve bacteriën worden waargenomen in de paarse kleur. | Zuurvaste bacteriën worden waargenomen in rode kleur en niet-zuurvaste bacteriën worden waargenomen in blauwe kleur. |
Samenvatting - Gramkleuring versus zuur snel
Visualisatie van micro-organismen in levende staat is moeilijk. Daarom worden biologische kleuringen en kleuringsprocedures uitgebreid gebruikt om hun eigenschappen te bestuderen. Differentiële kleuring is een type kleurtechniek dat wordt gebruikt om bacteriën te differentiëren. Gramkleuring en zuurvaste kleuring zijn twee differentiële kleuringstechnieken. Gramkleuring onderscheidt gramnegatieve bacteriën en grampositieve bacteriën op basis van de dikte van hun celwanden. Zuurvaste kleuring onderscheidt zuurvaste bacteriën van niet zuurvaste bacteriën op basis van het mycolzuurgehalte in de celwand. Dit is het verschil tussen zuurvast en gramkleuring.
Download de pdf-versie van Gram Stain vs Acid Fast
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en voor offline doeleinden gebruiken volgens de citatienota. Download hier de pdf-versie. Verschil tussen gramkleuring en zuur snel.
