Belangrijkste verschil - Gramkleuring versus cultuur
Gramkleuring is een kleuringstechniek die wordt uitgevoerd om bacteriën in twee groepen te onderscheiden op basis van de dikte van de peptidoglycaanlaag in hun celwand. Cultuur is een methode om micro-organismen onder laboratoriumomstandigheden te laten groeien en in stand te houden voor verschillende analyses. Het belangrijkste verschil tussen gramkleuring en cultuur is hun functie; gram stam een kleuringstechniek van bacteriën waarbij kweek een methode is om micro-organismen te laten groeien en in stand te houden.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is gramkleuring
3. Wat is kweek
4. Vergelijking zij aan zij - Gramkleuring versus kweek
5. Samenvatting
Wat is gramkleuring?
Gramkleuring is een belangrijke differentiële kleuringstechniek die wordt gebruikt voor bacteriële identificatie in de microbiologie. Deze techniek werd geïntroduceerd door de Deense bacterioloog Hans Christian Gram in 1884. Gramkleuring categoriseert bacteriën in twee hoofdgroepen: grampositief en gramnegatief; deze zijn erg belangrijk bij bacteriële classificatie en identificatie. Gramkleuring wordt uitgevoerd als een eerste stap voor bacteriële karakterisering.
Bacteriën worden gegroepeerd op basis van de verschillen in hun celwand. Grampositieve bacteriën bevatten een dikke peptidoglycaanlaag in hun celwand, terwijl Gramnegatieve bacteriën een dunne peptidoglycaanlaag in hun celwand hebben, zoals weergegeven in figuur 01. Het resultaat van de gramkleuring zal zijn gebaseerd op het dikteverschil in de peptidoglycaanlaag van de celwand.
Figuur 1: Gram-positieve bacteriën en Gram-negatieve bacteriën
Gramkleuring wordt uitgevoerd met behulp van vier verschillende reagentia, namelijk; primaire beits, bijtende, ontkleurende agent en tegenbeits. Kristalviolet en safranine dienen respectievelijk als de primaire en tegenkleuring, terwijl de gram jodium en 95% alcohol respectievelijk dienen als bijtmiddel en ontkleuring.
Basisstappen van Gramkleuring
- Een bacterieel uitstrijkje wordt gemaakt op een schoon glasplaatje, met warmte gefixeerd en gekoeld.
- Het uitstrijkje wordt 1 - 2 minuten overspoeld met kristalviolet.
- Smeer wordt gespoeld met langzaam stromend kraanwater om overtollige vlekken te verwijderen.
- Gram jodium wordt gedurende 1 minuut op het uitstrijkje aangebracht.
- Uitstrijkje wordt gespoeld met langzaam stromend leidingwater
- Het uitstrijkje wordt 2 - 5 seconden gewassen met 95% alcohol en gespoeld met langzaam stromend kraanwater.
- Het uitstrijkje wordt gedurende 1 minuut tegengekleurd met safranine
- Het uitstrijkje wordt met langzaam stromend kraanwater gespoeld, gedroogd en onder de microscoop bekeken.
Aan het einde van de gramkleuring worden gram-negatieve bacteriën in roze kleur waargenomen, terwijl de gram-positieve bacteriën in paarse kleur worden waargenomen, zoals weergegeven in figuur 02. Het resultaat van de gramkleuring wordt bepaald door de dikte van de peptidoglycaanlaag in hun celwand. Tijdens de ontkleuringstap worden de primaire vlek en het bijtmiddel gemakkelijk verwijderd uit de gramnegatieve bacteriën en worden ze kleurloos omdat ze een dunne peptidoglycaanlaag hebben. De primaire vlek blijft behouden in de gram-positieve bacteriën omdat ze een dikke peptidoglycaanlaag hebben. Tegenkleuring zal niet effectief zijn voor gram-positieve bacteriën vanwege het behoud van de primaire kleuring. Gram-positieve bacteriën zullen dus zichtbaar zijn in de primaire kleur van de vlek, dwz paarse kleur. Tegenkleuring zal de gramnegatieve bacteriën kleuren en zal zichtbaar zijn in de kleur van de pick, de safraninekleur. Daarom is het gemakkelijk om bacteriën in twee groepen te categoriseren door de gramkleuring en het is waardevol bij bacteriële differentiatie en identificatie.
Figuur 2: Gram-stam
Wat is cultuur?
Microbiële cultuur is een methode voor het kweken en onderhouden van micro-organismen onder laboratoriumomstandigheden voor verschillende doeleinden. Culturen worden gekweekt in vaste, halfvaste en vloeibare media op basis van het type en het doel van het kweken van micro-organismen. Culturen worden voorzien van de nodige voedingsstoffen en groeiomstandigheden die door de micro-organismen worden vereist. Er zijn verschillende componenten van een kweekmedium zoals energiebron, koolstofbron, stikstofbron, mineralen, micronutriënten, water, stollingsmiddel, enz. De optimale temperatuur, zuurstof en pH moeten worden aangepast aan het type micro-organisme dat wordt gekweekt.
Er zijn verschillende soorten microbiële culturen; bijvoorbeeld batchcultuur, continue cultuur, steekcultuur, agarplaatcultuur, bouilloncultuur, etc. Afhankelijk van de samenstelling van het groeimedium zijn er verschillende soorten cultuurmedia bekend als synthetische media, semi-synthetische media en natuurlijke media. Microbiële culturen worden onder steriele omstandigheden bereid in een speciale kamer die laminaire luchtstroom wordt genoemd. Het groeimedium en het glaswerk worden gesteriliseerd voorafgaand aan inoculatie van het gewenste micro-organisme. Onder de juiste steriele omstandigheden wordt het doelmicro-organisme overgebracht naar het gesteriliseerde voedingsmedium en bij optimale temperatuur geïncubeerd. In het medium zullen micro-organismen groeien en zich vermenigvuldigen met behulp van de geleverde voedingsstoffen.
Figuur 3: een bacteriecultuur op plaat
Wat is het verschil tussen Gramkleuring en Cultuur?
Diff Artikel Midden voor Tafel
Gramkleuring versus cultuur |
|
| Gram-stam is een differentiële kleuringstechniek die wordt gebruikt voor bacteriële differentiatie en identificatie. | Microbiële cultuur is een methode om micro-organismen in het laboratorium te laten groeien. |
| Componenten | |
| Hierbij worden verschillende reagentia gebruikt, waaronder twee kleuringen. | Hierbij worden verschillende kweekmedia gebruikt, zoals vaste, halfvaste en vloeibare media die zijn samengesteld uit voedingsstoffen en andere noodzakelijke voorwaarden. |
| Basisfuncties | |
| Hierdoor kunnen bacteriën in twee groepen worden ingedeeld: gram negatief en gram positief. | Hierdoor kunnen micro-organismen voor verschillende doeleinden worden vermeerderd. |
| Baseren | |
| Het resultaat van de gramkleuring is gebaseerd op de verschillen in de peptidoglycaanlaag van de celwand. | Micro-organismen zullen groeien en zich vermenigvuldigen in de kweekmedia. |
| Resultaat | |
| Gram-negatieve bacteriën zijn zichtbaar in roze kleur en gram-positieve bacteriën zijn zichtbaar in paarse kleur. | Op borden zijn kolonies van de micro-organismen te zien. Op vloeibare media zijn micro-organismen in gesuspendeerde vorm. |
Samenvatting - Gramkleuring versus cultuur
Microbiële culturen worden bereid en bewaard onder laboratoriumomstandigheden voor verschillende doeleinden, zoals opslag, testen, chemische zuivering, enz. Gramkleuring is een kleuringsprocedure die bacteriën in twee hoofdgroepen onderscheidt: gram-negatieve bacteriën en gram-positieve bacteriën. Daarom is het verschil tussen de gramkleuring en de kweek dat gramkleuring een kleuringstechniek van bacteriën is, terwijl de kweek een methode is om micro-organismen in de laboratoria te laten groeien en in stand te houden.
