Belangrijkste verschil - YAC versus BAC-vectoren
Vectoren worden gebruikt bij moleculair klonen. Een vector kan worden gedefinieerd als een DNA-molecuul dat zich gedraagt als een drager om vreemd genetisch materiaal naar een andere cel te brengen. Een vector die vreemd DNA bevat, staat bekend als recombinant DNA en zou het vermogen moeten hebben om het te repliceren en tot expressie te brengen in het gastheerorganisme. Gist kunstmatig chromosoom (YAC) en bacterieel kunstmatig chromosoom (BAC) zijn twee soorten vectoren die betrokken zijn bij het klonen. De belangrijk verschil tussen YAC en BAC is dat YAC een kunstmatig geconstrueerd vectorsysteem is dat een specifiek gebied van gistchromosoom gebruikt om grote segmenten van genetisch materiaal in gistcellen in te voegen, terwijl BAC een kunstmatig geconstrueerd vectorsysteem is dat een specifiek gebied van het E. coli-chromosoom gebruikt. om grote delen van DNA in E. coli-cellen in te voegen.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat zijn YAC-vectoren
3. Wat zijn BAC-vectoren
4. Vergelijking naast elkaar - YAC- versus BAC-vectoren
5. Samenvatting
Wat zijn YAC-vectoren?
YAC (Yeast artificial chromosome) is een kunstmatig gebouwd chromosoom dat het vermogen heeft om een groot deel van vreemd DNA te dragen en zich te vermenigvuldigen in de gistcellen. Het heeft een centromeer, telomeren en autonoom replicerende sequenties die essentieel zijn voor replicatie en stabiliteit. YAC zou ook een selectieve marker of markers en restrictiesites moeten dragen om er een effectieve kloneringsvector van te maken. Een grote sequentie, variërend van 1000 kb tot 2000 kb, kan in YAC worden ingevoegd en in gist worden overgebracht. De transformatie-efficiëntie van YAC is erg laag.
Figuur 01: YAC-vector
Wat zijn BAC-vectoren?
Bacterieel kunstmatig chromosoom (BAC) is een kunstmatig geconstrueerd chromosoom voor moleculair klonen. Het heeft specifieke gebieden van E. coli F-plasmide en het is rond en super opgerold. BAC is ontwikkeld om DNA-fragmenten naar bacteriën te klonen, vooral naar E. coli. Het kan DNA-fragmenten dragen met een grootte tot 300 kb. In vergelijking met YAC zijn BAC-klooninserts kleiner van formaat. BAC's zijn ontwikkeld in 1992 en zijn nog steeds populair vanwege de stabiliteit en het gemak van constructie. BAC's zijn ook nuttig bij het ontwikkelen van vaccins.
Figuur 02: BAC-vector bij moleculair klonen
Wat is het verschil tussen YAC- en BAC-vectoren?
Diff Artikel Midden voor Tafel
YAC versus BAC-vectoren |
|
| YAC is een genetisch gemanipuleerd chromosoom met het gebruik van gist-DNA voor het klonen. | BAC is een genetisch gemanipuleerd DNA-molecuul dat E. coli-DNA gebruikt om te klonen. |
| Geslacht | |
| YAC's werden ontworpen om grote fragmenten van genomisch DNA in gist te klonen. | BAC's werden ontwikkeld voor het klonen van grote genoomfragmenten in Escherichia coli. |
| Lengte invoegen | |
| YAC's kunnen genomische inserts van megabase-grootte bevatten (1000 kb - 2000 kb). | BAC's kunnen inserts van 200-300 kb of minder bevatten. |
| Bouw | |
| YAC-DNA is moeilijk intact te zuiveren en vereist een hoge concentratie voor het genereren van een YAC-vectorsysteem. | BAC is gemakkelijk intact te zuiveren en kan gemakkelijk worden geconstrueerd. |
| Chimerisme | |
| YAC's zijn vaak chimeer. | BAC's zijn zelden chimeer. |
| Stabiliteit | |
| YAC is onstabiel. | BAC is stabiel. |
| Wijzigingen | |
| Gistrecombinatie is heel goed mogelijk en blijft altijd actief. Daarom kan het verwijderingen en andere herschikkingen in een YAC genereren. | E. coli-recombinatie wordt voorkomen en wordt indien nodig ingeschakeld. Daarom vermindert het de ongewenste herschikkingen in BAC's. |
| Onderhoud | |
| Het manipuleren van recombinante YAC's vereist gewoonlijk dat YAC wordt overgebracht naar E. coli voor daaropvolgende manipulatie. Daarom is het een moeizaam proces. | BAC-modificatie vindt direct plaats in E. coli. Er is dus geen DNA-overdracht nodig. Daarom is het proces niet omslachtig. |
Samenvatting - YAC versus BAC-vectoren
YAC is een essentieel onderzoeksinstrument geworden bij het klonen van processen vanwege het vermogen om grote fragmenten van DNA in het gastheerorganisme te klonen. YAC's hebben echter verschillende nadelen, zoals vectoren, zoals constructiemoeilijkheden, chimerisme, instabiliteit, enz. Om deze problemen op te lossen, hebben wetenschappers BAC-vectoren ontwikkeld. BAC is geconstrueerd met behulp van specifieke regio's van het E. coli-chromosoom. Het is een stabiele vector en kan gemakkelijk worden geconstrueerd. De lengte van het DNA dat BAC aankan, is echter tot 20 keer minder dan die van YAC. Dit is het verschil tussen YAC- en BAC-vectorsystemen. Tegenwoordig heeft BAC in de laboratoria meer de voorkeur boven YAC.
