Belangrijkste verschil - Transformanten versus recombinanten
Recombinatie en transformatie zijn twee cruciale stappen in genetische manipulatie, waarbij de kenmerken van een organisme opzettelijk worden gewijzigd door het genetisch materiaal ervan te manipuleren. Recombinatie is een proces waarbij vreemd DNA wordt opgenomen in een vectorgenoom en een recombinant DNA-molecuul wordt gevormd. Transformatie is de volgende stap waarin een recombinant molecuul in het gastheerorganisme wordt ingevoerd. De gastheercel of het organisme vergemakkelijkt de expressie van het recombinante molecuul. Het belangrijkste verschil tussen transformanten en recombinanten is dat transformanten de cellen of de organismen zijn die het recombinante molecuul naar binnen nemen en de expressie vergemakkelijken, terwijl recombinanten de vectoren zijn die het inbrengen van het vreemde DNA in het genoom ervan mogelijk maken en transporteren naar gastheertransformanten voor expressie.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat zijn transformanten
3. Wat zijn recombinanten
4. Vergelijking zij aan zij - Transformanten versus recombinanten
5. Samenvatting
Wat zijn transformanten?
Transformanten zijn de cellen of de organismen waarin recombinant DNA wordt opgenomen voor de expressie. Bacteriën worden vaak gebruikt als gastheerorganismen bij genetische manipulatie, omdat ze gemakkelijk te kweken, vermenigvuldigen en hanteren onder laboratoriumomstandigheden en het transformatieproces eenvoudig is in vergelijking met andere organismen. De meest populaire gastheerbacterie die bij genetische manipulatie wordt gebruikt, is bacterie E. coli.
Tijdens het transformatieproces worden gastheercellen ertoe aangezet de recombinanten op te nemen. Sommige gastheercellen nemen echter geen recombinante moleculen op. Ze staan bekend als niet-transformanten en de cellen die recombinante DNA-moleculen bevatten, staan bekend als transformanten. Selectie van transformanten uit niet-transformanten wordt gedaan met behulp van selecteerbare markers in de moleculaire biologie. Selecteerbare markers worden samen met de DNA-insert in het vectorgenoom ingevoegd. Veel gebruikte selecteerbare markers zijn antibioticaresistente genen. Markergenen vergemakkelijken de differentiatie van transformanten en zetten het proces voort. Na het transformatieproces wordt de bacterie gekweekt in een antibioticumhoudend medium. Alleen de transformanten zijn in staat om op dat medium te groeien, aangezien ze de recombinanten binnenin bezitten.
Zodra het recombinante DNA-molecuul in het gastheerorganisme is getransformeerd, kan het vreemde DNA ofwel worden geïntegreerd in het genoom van de gastheercel of niet geïntegreerd blijven in het cytoplasma. De expressie en de replicatie van het vreemde DNA vinden echter plaats in het gastheerorganisme en produceren het gewenste resultaat van het proces.
Wat zijn recombinanten?
Een recombinant is een organisme of een cel die een gerecombineerd genoom bezit dat vreemd DNA bevat. Recombinanten zijn het resultaat van het genetische manipulatieproces. Ze worden in vitro kunstmatig geconstrueerd door de genen van belang in te voegen en het genoom te wijzigen. Vaak fungeren bacteriële plasmiden en bacteriofagen als recombinanten bij genetische manipulatie. Het heeft hersenschim van verschillende DNA's. Recombinant DNA-molecuul draagt vreemd DNA naar het gastheerorganisme en zorgt ervoor dat het het gewenste product tot expressie brengt en vormt.
Recombinante moleculen worden geconstrueerd met behulp van restrictie-endonucleasen en DNA-ligasen. Het gewenste DNA-fragment wordt gescheiden van het oorspronkelijke organisme en in de vector ingebracht om de recombinant voor transformatie te maken. Het uitsnijden van het gen van belang en het openen van het vectororganisme moet worden gedaan met hetzelfde restrictie-enzym om compatibele kleverige uiteinden te creëren om ze samen te voegen. Zodra het vreemde DNA in het vectorgenoom is opgenomen, staat het bekend als recombinant of het recombinante DNA-molecuul.
Figuur 02: Recombinant DNA
Wat is het verschil tussen transformanten en recombinanten?
Diff Artikel Midden voor Tafel
Transformanten versus recombinanten |
|
| Transformanten zijn de cellen met daarin een recombinant DNA-molecuul. | Recombinanten zijn de dragermoleculen waarbij vreemd DNA in het eigen genoom is ingebracht. |
| Expressie van vreemd DNA | |
| Het zijn de gastheercellen die het recombinante DNA tot expressie kunnen brengen. | Ze moeten zichzelf kunnen repliceren in het gastheerorganisme. |
| Selectie | |
| Cellen die gemakkelijk kunnen worden gekweekt en vermenigvuldigd, worden geselecteerd als gastheercellen. | Ze moeten gemakkelijk te extraheren zijn en selecteerbare markeringen bevatten. |
Samenvatting - Transformanten versus recombinanten
Transformanten zijn de cellen of organismen met daarin recombinante DNA-moleculen. Recombinanten zijn de organismen of de cellen die genetische recombinatie hebben ondergaan en vreemd DNA in hun genomen hebben. Bacteriële cellen worden vaak gebruikt als gastheercellen voor transformatie en plasmiden en bacteriofagen worden vaak gebruikt als vectoren in recombinant-DNA-technologie. Dit is het verschil tussen transformanten en recombinanten.
