Belangrijkste verschil - CFU versus MPN
Kolonievormende eenheid (CFU) en meest waarschijnlijke aantal (MPN) zijn twee methoden die worden gebruikt om micro-organismen in monsters te tellen. Beide parameters worden gebruikt om de waterkwaliteit en fecale indicatorbacteriën in watermonsters te detecteren. Kolonievormende eenheid is een maat die wordt gebruikt om het aantal levensvatbare bacteriële cellen of schimmelcellen op te sommen in een specifiek volume of gewicht van een bepaald monster. De standaardeenheid voor deze parameter is CFU / ml of CFU / g. Het meest waarschijnlijke aantal is een andere eenheid die wordt gebruikt om het aantal levensvatbare bacteriële cellen in een vloeibaar monster te meten. Het belangrijkste verschil tussen CFU en MPN is dat CFU wordt berekend op basis van de bacteriële en schimmelkolonies die groeien op een vaste agarplaat, terwijl MPN wordt berekend op basis van levensvatbare bacteriën die groeien in een vloeibaar medium.
INHOUD
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is CFU
3. Wat is MPN
4. Vergelijking zij aan zij - CFU versus MPN in tabelvorm
5. Samenvatting
Wat is CFU?
Kolonievormende eenheid (CFU) is een parameter die het aantal levensvatbare bacteriële of schimmelcellen in een bepaald monster meet. De methode die kolonievormende eenheden telt, wordt het standaard aantal platen genoemd. De levensvatbare kolonies die op de agarplaten verschijnen, worden uitgedrukt als CFU per 1 ml (kolonievormende eenheid per milliliter) van het monster voor vloeistoffen of CFU per 1 g (kolonievormende eenheid per gram) van het monster voor vaste stoffen.
Er zijn twee veelgebruikte methoden om CFU in een monster te meten. Het zijn de verspreidingsplaatmethode en de gietplaatmethode. Deze twee methoden worden ondersteund door een techniek die seriële verdunning wordt genoemd. Serieus verdunde monsters maken het mogelijk om een telbaar aantal kolonies op het agaroppervlak te verkrijgen. Een bekend volume van het monster kan op het oppervlak van een agarplaat worden uitgespreid, of met agar worden gemengd en op een plaat worden gegoten. De plaat wordt vervolgens geïncubeerd en de ontstane kolonies worden geteld. Het aantal kolonies heeft betrekking op het aantal micro-organismen in het oorspronkelijke monster. De platen die te veel kolonies of te weinig kolonies vertonen, worden niet meegeteld omdat de resultaten op die platen mogelijk niet statistisch nauwkeurig zijn. Statistisch gezien is het beste bereik 30 - 300 kolonies op een agarplaat. Daarom moeten de juiste platen worden geselecteerd voor een nauwkeurige telling. Seriële verdunning wordt uitgevoerd voor de bovenstaande functie.
Nadat u het aantal levensvatbare kolonies op platen hebt geteld, kan CFU / ml worden berekend met behulp van de volgende vergelijking.
CFU per ml origineel monster = aantal kolonies op een plaat X verdunningsfactor
Verdunningsfactor = (1 / verdunning van de plaat)
Als u bijvoorbeeld 149 kolonies op de plaat van de 10-4 verdunning krijgt, kan het aantal bacteriën in 1 ml van het originele monster als volgt worden berekend:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 10 4 of 1490000
= 1,49 x 10 6
Figuur 01: Kolonie-vormende eenheid
Wat is MPN?
Het meest waarschijnlijke getal is een alternatieve maat voor CFU / ml. MPN schat ook de levensvatbare cellen in een vloeibaar monster. Het telt organismen die groeien in een vloeibare cultuur en is een overwegend bacteriologische techniek. Deze methode is vooral nuttig voor monsters die lage concentraties bacteriële cellen bevatten; bijvoorbeeld melk, drinkwater enz. De MPN-waarde wordt uitgedrukt voor 100 ml volume. MPN vertrouwt op een statistische methode die is gebaseerd op kansrekening. Er zijn statistische tabellen die zijn ontworpen om MPN-waarden per 100 ml van het monster te vinden. Deze tabellen tonen de resultaten bij een betrouwbaarheidsgrens van 95%.
De MPN-waarde wordt berekend na het uitvoeren van een techniek die fermentatiemethode met meerdere buizen wordt genoemd. Drie sets buisjes die een geschikt kweekmedium bevatten, worden geïnoculeerd met drie verschillende volumes van het monster zoals 10 ml, 1 ml en 0,1 ml en geïncubeerd voor de groei. Na de incubatieperiode worden buisjes gescoord met + (positief) of - (negatief) voor de aan- of afwezigheid van groei. Het patroon van positieve en negatieve resultaten wordt vervolgens vergeleken met een MPN-tabel met statistische waarschijnlijkheden om het aantal micro-organismen te schatten. Vervolgens wordt de MPN-waarde gegeven voor 100 ml van het monster. MPN wordt veel gebruikt om colibacteriën in watermonsters te detecteren.
Figuur 02: MPN-tabel
Wat is het verschil tussen CFU en MPN?
Diff Artikel Midden voor Tafel
CFU versus MPN |
|
CFU is een maat die wordt gebruikt om het aantal levensvatbare bacteriële of schimmelkolonies in een bepaald monster uit te drukken. | MPN is een alternatieve maat voor CFU en meet het aantal levensvatbare bacteriële cellen in een vloeibaar monster. |
Eenheid | |
CFU / ml of CFU / g | MPN / 100 ml |
Berekening | |
CFU wordt berekend door het aantal kolonies te tellen dat op agarplaten wordt gekweekt. | MPN wordt berekend door positieve en negatieve patronen van de buisjes te vergelijken met de statistische MPN-tabel. |
Seriële verdunningstechniek | |
Seriële verdunning wordt uitgevoerd voordat de monsters op agarplaten worden geplaatst. | Seriële verdunning wordt normaal gesproken niet uitgevoerd wanneer MPN wordt berekend |
Methoden | |
De spreidplaatmethode en de gietplaatmethode zijn twee soorten methoden die worden uitgevoerd om CFU te verkrijgen. | Gisting met meerdere buizen is de methode die wordt uitgevoerd om de MPN-waarde te verkrijgen. |
Samenvatting - CFU versus MPN
Het meten van de microbiële groei is om vele redenen vereist. In voedselverwerkende fabrieken is het nodig om het niveau en type micro-organismen in voedsel te meten. In de voedingsindustrie en de geneeskunde is het noodzakelijk ervoor te zorgen dat sterilisatiebehandelingen effectief worden toegepast. In rioolwaterzuiveringsinstallaties is het vereist routinematig microbiële telling te doen. Bij het optimaliseren van de procedure in de moleculaire biologie is het nodig om het aantal kolonies op platen te meten. Daarom zijn er verschillende opsommings- en groeimetingsmethoden beschikbaar. CFU en MPN zijn twee van dergelijke methoden die op verschillende gebieden algemeen worden toegepast. CFU is een maat voor het aantal levensvatbare bacteriële en schimmelkolonies dat in een bepaald monster aanwezig is. Het wordt berekend met behulp van de standaard methode voor het tellen van platen of de methode voor het tellen van levensvatbare platen. MPN is een andere maat die het aantal bacteriecellen in een bepaald volume van het vloeibare monster uitdrukt. Het wordt berekend met behulp van fermentatiemethode met meerdere buizen en de MPN-tabel. Dit is het verschil tussen CFU en MPN.
Download de pdf-versie van CFU versus MPN
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en voor offline doeleinden gebruiken volgens de citaten. Download hier de pdf-versie Verschil tussen CFU en MPN.